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Título : Evaluación de probióticos en alimentos fermentados y productos farmaceúticos de México
Autor : PASTELIN PALACIOS,RODOLFO
ESCALANTE LOZADA,JOSE ADELFO
Fecha de publicación : 2021
Resumen : Existe en el mercado nacional y regulatorio, una carencia de normatividad que cubran los aspectos básicos del análisis y conocimiento del efecto de estos productos comerciales o autóctonos que contienen probióticos. Para las asignaturas 1610 y 1619, se trabajará en el aislamiento de bacterias lácticas presentes en productos fermentados comerciales y artesanales y en productos farmaceúticos. Se determinará la concentración del grupo microbiano en ambos tipos de productos y se obtendrán cultivos axénicos. Se evaluarán in vitro respecto a su resistencia enzimática y química de ambiente-intestinal y se confrontarán en un ensayo de antibiosis en placa contra la cepa S. Typhimurium, se determinarán para éstas, la capacidad de resistencia a antibióticos. Se identificarán empleando sistemas comerciales. Las cepas se conservarán. Las mejores cepas se evaluarán en modelo in vivo en la asignatura 1709. Se suplementarán via oral a ratones Balb/c para posteriormente confrontarlos con dosis única de S. Typhimurium y ver el nivel de infección en hígado y bazo. Desarrollados los protocolos experimentales, se aplicarán en grupos de laboratorio piloto a cargo de los responsables y colaboradores de este proyecto, quienes vigilarán y registrarán áreas de oportunidad para que se aplique de manera sólida a toda la población a quien va dirgida posteriormente. Antes de iniciar el segundo año de este proyecto se efectuarán cursos-taller al colegio de profesores de las tres asignaturas, a fin de que iniciando el segundo año se inicie la implementación semestral constante para ambas. Asi mismo, se organizará un Simposio con expertos del tema donde asistan los estudiantes. Los trabajos de tesis desarrollados en este proyecto se expondrán en Congresos afines en el segundo año de su duración.
URI : https://www.innovacioneducativa.unam.mx:8443/jspui/handle/123456789/7786
metadata.dc.contributor.responsible: PASTELIN PALACIOS,RODOLFO
metadata.dcterms.callforproject: 2021
metadata.dc.coverage.temporal: 2021-2023
metadata.dcterms.educationLevel: nivel superior
metadata.dcterms.educationLevel.SEP: Licenciatura
metadata.dc.description.objective: Objetivo general: Desarrollar protocolos experimentales que verifiquen la capacidad probiótica de microorganismos presentes en alimentos fermentados y en formulaciones farmacéuticas, para permitir a los alumnos que cursan las asignaturas de Microbiología de Alimentos, Bacteriología Experimental e Inmunología General identificar grupos microbianos que poseen capacidades de sobrevivencia a los ambientes intestinales de humanos y que ejercen efectos benéficos al ser ingeridos. Capacitar al personal docente involucrado en el proyecto para pernear la aplicación de estas técnicas y posibilitar su pronta implementación en los ejercicios de laboratorio de las asignaturas mencionadas. Objetivos específicos: "Desarrollar el protocolo experimental en ambiente presencial y virtual para la recuperación y evaluación in vitro de las características idóneas que se requieren en alimentos fermentados que contengan microorganismos probióticos para la asignatura Microbiología de Alimentos (1619). Desarrollar el protocolo experimental en ambiente presencial y virtual para la recuperación y evaluación in vitro de las características idóneas que se requieren en formulaciones farmaceúticas con microorganismos probiótico para la asignatura Bacteriología Experimental (1610). Desarrollar el protocolo experimental en ambiente presencial y virtual para la evaluación en modelo animal de las cepas probióticas detectadas en las matrices empleadas para la asignatura Inmunología General (1708). Generar guías instruccionales para la recuperación y caracterización de microorganismos probióticos a partir de diversas matrices alimentarias y formulaciones farmaceuticas, para la adquisición del conocimiento del tema en entornos presenciales o virtuales. Actualizar al alumnado en el estado del arte de los productos que contienen probióticos mediante un Simposio con expertos en el área. Complementar la formación del alumno Gerardo Arturo Márquez Estévez para lograr la obtención del grado de Licenciatura en Química de Alimentos. Presentar el trabajo que se derive del presente proyecto en un Congreso Nacional ad hoc al tema, para divulgar las actividades contemporáneas de docencia que se realizan en la Institución."
metadata.dc.description.strategies: De ser autorizado el proyecto e inicialmente en cuanto se cuente con los recursos se adquirirán los insumos para iniciar la parte experimental del protocolo. Se obtendrán: a) productos lácteos fermentados comerciales, b) formulaciones farmacéuticas con probióticos, c) pulque de la Cd. de México y d) pulque de una localidad de Morelos. Para cada uno de ellos se realizará la recuperación y cuantificación en medios selectivos para bacterias lácticas, del crecimiento obtenido se procederá al aislamiento, purificación y conservación de cepas. Se corroborará in vitro la resistencia a lisozima, sobrevivencia a pH=3.5 y a las sales biliares al 0.3%. De las cepas que tengan un mejor porcentaje de sobrevivencia se realizarán ensayos de antibiosis contra Salmonella Typhimurium PhoP- por el método de difusión con sobrecapa de agar, y los ensayos de resistencia a antimicrobianos por el método de difusión en disco, así mismo de manera conjunta se realizará la identificación fenotípica con el sistema API50CHL. Los procedimientos descritos a continuación serán aprobados y realizados según la normativa del Comité Institucional para el Cuidado y Uso de los Animales de Laboratorio (CICUAL) de la Facultad de Química, UNAM. El efecto protector de las cepas con mejores características se evaluará en un modelo in vivo. Se suplementará la dieta con los probióticos seleccionados por una semana en ratones Balb/c de 6 a 8 semanas de edad para después evaluar esta presencia frente a la infección con Salmonella PhoP- (cepa con virulencia atenuada). Los animales serán proporcionados por el Bioterio de la Facultad, criados en apego a la normatividad. La eutanasia de éstos se realizará de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999, se retirará el hígado y el bazo. Se evaluará en estos órganos la concentración de Salmonella. Se elaborará el protocolo experimental, ejercicios o cuestionarios de retroalimentación y reforzamiento del aprendizaje, exámenes y material audiovisual de apoyo para los estudiantes y profesores de los colegios de las asignaturas implicadas. Se planea realizar este material para cada asignatura de manera escrita y plataformas virtuales. Los colaboradores del proyecto han sido instruidos por el CODEIC-UNAM y EDUCATIC-UNAM, en la elaboración de reactivos y diseño instruccional en plataformas virtuales durante el transcurso del año 2020. Para el segundo semestre se aplicará el protocolo experimental en grupos piloto a cargo de los colaboradores del proyecto, en éstos se aplicarán los exámenes , cuestionarios, ambos en plataforma virtual y los estudiantes reportarán los resultados obtenidos así mismo en plataformas virtuales. De ser posible derivado de la pandemia, en el caso de que pueda asistirse a instalaciones se optará por el desarrollo presencial de las actividades, pero empleando el material virtual que se genere. Derivado de esta experiencia se pretende mejorar el protocolo con las fortalezas y debilidades que se detecten. Así mismo se estima que en el primer año el alumno colaborador del Servicio Social Gerardo Arturo Márquez Estévez participe y concluya su Servicio Social y así mismo que tenga un alto porcentaje de avance en la tesis y que presente su trabajo en el XIX Congreso Nacional de Biotecnología y Bioingeniería a realizarse en septiembre del año 2021. Durante el segundo año se pretende continuar con la adquisición de los insumos necesarios para lograr una implementación global del proyecto en los semestres 2022-2 y 2023-1 en las tres asignaturas. La organización de reuniones colegiadas proporcionará información en la factibilidad de coordinación, aplicación y calendarización mas adecuada con los Colegios de Profesores de las tres asignaturas. Antes del inicio del semestre 2022-2 se realizarán cursos-taller de capacitación para el Colegio de Profesores de las asignaturas implicadas, derivados de los mismos se podrán modificar las herramientas de enseñanza y aprendizaje a fin de fortalecerlas. Se procederá entonces a la implementación del protocolo experimental en todos los grupos de laboratorio de Microbiología de Alimentos, Bacteriología Experimental e Inmunología General. En estos se aplicarán los cuestionarios, exámenes y se evaluarán los reportes generados por el alumnado. Para el fortalecimiento del estado del arte en el tema de probióticos en diferentes ámbitos durante el año 2022 se contará con un Simposio virtual con el tema Probióticos y Microbiota Intestinal con expertos del área, donde asistirían alumnos de las Licenciaturas de Química de Alimentos y Químico Farmaceútico Biólogo, cursando desde el cuarto semestre, se tiene contacto con expertos en Industrias (Yakult de México), Instituciones de Salud e investigadores extranjeros. El tesista Gerardo Arturo Márquez Estévez concluirá la tesis experimental y obtendrá el título de Licenciatura en Química de Alimentos. Por último, se elaborará el reporte global y redactarán experiencias y aprendizajes globales del proyecto.
metadata.dc.description.goals: Primer año: Para el establecimiento del protocolo experimental, realización de experimentos y material audiovisual en ambiente virtual del presente proyecto durante el primer año las actividades a lograr serán: 1.Adquisición de reactivos, medios de cultivo, material y equipo necesario para iniciar la experimentación. 2. Obtención de muestras comerciales de leches fermentadas comerciales, formulaciones farmacéuticas y de pulque de la Cd. De México y Morelos. 3. Obtención de protocolo derivado de experimentación en concentración de bacterias lácticas viables evaluación de características de resistencia enzimáticas, fisicoquímicas y sustancias antimicrobianas in vitro. 4. Ensayos de antibiosis contra Salmonella Typhimurium PhoP- 5. Identificación fenotípica. 6. Evaluar del efecto protector del probiotico in vivo en modelo animal frente a la infección con Salmonella PhoP-. 7. Desarrollo, escritura y videograbación narrada de los protocolos experimentales y material audiovisual de apoyo para los estudiantes y profesores de los colegios de Microbiología de Alimentos, Bacteriología Experimental e Inmunología General. 8. Implementación del protocolo experimental en grupos piloto, con aplicación de las herramientas generadas para fortalecer la enseñanza y aprendizaje en plataformas virtuales o de ser posible de forma . 9. Conclusión del Servicio Social del colaborador estudiante tesista Gerardo Arturo Márquez Estévez 10. Inicio de la tesis experimental del colaborador estudiante tesista Gerardo Arturo Márquez Estévez. 11. Presentación de los trabajos generados en el XIX Congreso Nacional de Biotecnología y Bioingeniería a realizarse durante el segundo semestre del año 2021. Segundo año: "Para lograr la implementación del protocolo experimental en toda la población estudiantil que cursa los laboratorios de Microbiología de Alimentos, Bacteriología Experimental e Inmunología General las metas propuestas son: 1. Adquisición de reactivos, medios de cultivo, material y equipo necesario para la experimentación en la totalidad de los grupos programados. 2. Realización de reuniones colegiadas. 3. Realización de curso-taller de capacitación para el Colegio de Profesores de ambas asignaturas. 4. Implementación del protocolo experimental en todos los grupos de laboratorio de Microbiología de Alimentos, Bacteriología Experimental e Inmunología General. En estos se aplicarán los cuestionarios, exámenes y se evaluarán los reportes generados por el alumnado. 5. Conclusión de la tesis experimental y obtención del título para la Licenciatura en Química de Alimentos del colaborador tesista Gerardo Arturo Márquez Estévez. 6. Realización de Simposio virtual con el tema Probióticos y Microbiota Intestinal. 7. Elaboración de reporte global y experiencia globales del proyecto."
metadata.dc.description.selfAssessment: El proyecto PE203821 es el primer proyecto integrativo que desarrollaron el responsable y corresponsable entre varias asignaturas y Licenciaturas impartidas en la Facultad de Química , UNAM. La aplicación del protocolo en su mayoría fue altamente redituable para la asignatura Microbiología de Alimentos, donde se generó el protocolo experimental escrito e implementó en todos los grupos aunque es necesario enfatizar en la evaluación de los estudiantes en varios grupos para verificar la adquisición del conocimiento. Así mismo, tanto los profesores como los estudiantes donde se implementó el protocolo en la asignatura Bacteriología Experimental resultó de alta aceptación al mostrar una visión diferente de la presencia de microorganismos en productos farmacéuticos y sus beneficios. En ambas asignaturas los estudiantes reflexionaron sobre la necesidad de implementar un marco normativo, ya que quedó evidente la presencia de algunos productos que no cumplen los criterios mínimos para ser designados como probióticos. Se logró la formación de recursos humanos participantes del proyecto pero derivado de las condiciones pandémicas y requerimientos para la manutención se ha retrasado la titulación de uno de los estudiantes que debió haber concluido con la realización del examen profesional, aunque se espera lo haga en un futuro muy cercano, además existió la difusión de los trabajos generados por estos estudiantes al ser presentado en Congresos Nacionales. Las habilidades adquiridas en el ambiente pandémico por parte de los participantes del proyecto fue redituable en la generación de productos multimedia que cubren la totalidad de los aspectos experimentales para las asignaturas 1610 y 1619. En proyectos PAPIME donde se ha participado con anterioridad, no se habían realizado videograbaciones instruccionales. Así mismo, hubo la posibilidad de intercambiar archivos y documentación en plataformas digitales (Classroom) e inclusive evaluación tipo examen remota por la plataforma Moodle. Sin embargo fue muy optimista y arriesgado ponderar la asignatura Inmunología General, ya que esta última etapa debió de plantearse para un proyecto PAPIME de duración mayor o bien un proyecto individual para una siguiente etapa del estudio de probióticos. Nos enfrentamos a las condiciones de restricción a acceder a instalaciones y derivado de esta razón se acortó el tiempo para lograr los objetivos planteados en el proyecto para esta asignatura. Aunque se logró la autorización del protocolo de experimentación por el CICUAL y el desarrollo de un prototipo de protocolo. Así mismo, por la complejidad al tratarse de dos asignaturas de alta matrícula, es necesario trabajar mas en los Cursos-Taller para profesores para aumentar su grado de reflexión en incentivar en el estudio de este tipo de productos y su análisis microbiológico, En lo general, representó un gran reto pero se requiere de mayor tiempo para lograr la implementación en su totalidad.
metadata.dc.description.goalsAchieved: 1. Adquisición de caldos selectivos para desarrollo de bacterias lácticas, sales biliares, sistemas de identificación API 50 CHL, material plástico (puntas de micropipeta, microtubos, crioviales de diferente capacidad), pago de derechos-compra para uso in silicio del Software APIWeb, cámara de electroforesis y fuente de poder, pago de servicio de secuenciación al Instituto de Biotecnología de la UNAM. Adquisición de muestras de alimentos fermentados lácteos comerciales o alimentos tradicionales (pulque) y 5 formulaciones farmacéuticas. 3. Redacción y revisión del protocolo experimental a aplicar para la asignatura 1619 y 1610, a partir de la experiencia generada con la tesis experimental de los estudiantes tesistas. 4. Se realizaron ensayos de antibiosis contra S. Typhimurium ATCC 14028 y Listeria monocytogenes proporcionada por el Cepario, Facultad de Química. 5. Identificación fenotípica por el sistema comercial API 50CHL de diversas cepas probióticas. 7. Generación de material audiovisual para la cuantificación, evaluación de sobrevivencia in vitro de condiciones gastrointestinales, ensayos de antibiosis, identificación con el sistema API 50CHL e identificación molecular por análisis de secuencias del gen rrs. 8. Aplicación del protocolo experimental mediante el material audiovisual generado a partir del semestre 2022-1. 9. El alumno Gerardo Márquez Estevez concluyó su Servicio Social el 20 junio del 2021, e inició su tesis experimental el 29 de abril de ese mismo año. 11. Se incorporó al proyecto la alumna Abigail Carrillo analizando cepas probióticas obtenidas del Kefir. A fines del año 2021 se incorporó la estudiante Elisa Ponce García 12. Presentación de dos trabajos en el XIX Congreso Nacional de Biotecnología y Bioingeniería. 13. Se realizó Curso-Taller en febrero 11, 18 y 25 de 2022, al personal académico que pudiera estar interesado en aplicar el protocolo experimental para las asignaturas Microbiología de Alimentos, Bacteriología Experimental e Inmunología General. Durante el taller se hicieron reuniones colegiadas. 14. Se implementó el protocolo experimental a partir del semestre 2022-2 de forma presencial para la totalidad de los grupos de Microbiología de Alimentos y durante el semestre 2023-1 para 3 grupos de Bacteriología Experimental. Se aplicaron diversas estrategias de evaluación como informe de práctica, examen de conocimientos. elaboración de diagramas. 15. Se realizó un taller estudiantil extracurricular intersemestral del 10 al 13 de enero de 2023 para la identificación molecular de las cepas. 16. Se concluyeron dos tesis experimentales. La Q.A. Abigail Carrillo obtuvo el título el 28 de noviembre de 2022. El alumno Gerardo Márquez se encuentra finalizando las correcciones del trabajo escrito de tesis. La alumna Elisa Ponce registró su servicio social de octubre 2022 a abril 2023 y el trabajo de tesis con fecha 15 diciembre 2022.
metadata.dcterms.provenance: Facultad de Química
metadata.dc.subject.DGAPA: Microbiología
metadata.dc.type: Proyecto PAPIME
metadata.dc.contributor.coresponsible: ESCALANTE LOZADA,JOSE ADELFO
Aparece en las colecciones: 2. Área de las Ciencias Biológicas, Químicas y de la Salud

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