Estandarización de métodos histológicos: contribución a la evaluación de indicadores del estado de salud de peces del Estado de Yucatán.

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Título :	Estandarización de métodos histológicos: contribución a la evaluación de indicadores del estado de salud de peces del Estado de Yucatán.
Autor :	ROBLES MENDOZA, CECILIA
Fecha de publicación :	2019
Resumen :	El presente proyecto se propone como continuación de un proyecto anterior cuyo objetivo ha sido estandarizar los procedimientos metodológicos para la cuantificación del estado de salud de peces a través de indicadores e índices. La aplicación de estos procedimeintos permitirá hacer el diagnóstico del estado de los recursos bióticos de la Península de Yucatán. Las respuestas histológicas y morfológicas son relevantes pues otorgan informacion integral de daños desde el nivel bioquímico, celular y fisiológico. En México son escasos los estudios que integren respuestas de diferentes niveles de organización biológica con el fin de evaluar el estado de salud de los organismos silvestres, y con ello realizar el disgnóstico de la calidad de los ambientes donde habitan. La escases de estudios también radica en la falta de métodos estandarizados de los procedimientos para la realización de estudios histopatológicos de organismos de especies nativas que además garanticen la calidad de los datos obtenidos. Estas herrameintas contribuirán en la generación de un manual que integre los procedimientos estandarizados para el diagnóstico de la salud de organismos, principalmente de peces, los cuales son considerados excelentes indicadores de la calidad ambiental. Los protocolos se aplicarán para hacer una diagnóstico preeliminar de la salud reproductiva, hepática y respiratoria de peces de importancia ecológica, através del análisis histológico de gónadas, hígado y branquias. Los procedimientos que se proponene en este proyecto enriquecerán la serie de métodos de diagnóstico de la salud de especies indicadoras que se estan trabajando en área de Ecotoxicología de la Facultad de Ciencias-UMDI-Sisal. Con ello se pretende contar con un conjunto de herramientas para la evaluación integral de la salud de organismos silvestres de la zona costera del estado de Yucatán, en particular, y de la Península de Yucarán en general.
URI :	http://132.248.161.133:8080/jspui/handle/123456789/7140
metadata.dc.contributor.responsible:	ROBLES MENDOZA, CECILIA
metadata.dc.coverage.temporal:	2019-2020
metadata.dc.description.objective:	Generar protocolos metodológicos que apoye a profesionistas en el desarrollo de estudios de diagnóstico de biota silvestre, como los peces, y así estimar el impacto de las actividades humanas. Estos protocolos facilitarán el proceso de diagósis de la calidad ambiental de ecosistemas vulnerables como las zonas costeras, y facilitará el trabajo de alumnos de carreras multidisciplinarias (i. e. Manejo sustentable de zonas costeras, Ciencias de la tierra, Ciencias ambientales) que no necesariamente tienen una formación especializadas de las ciencias biológicas. Los protocolos se aplicarán en un análisis de la condición histológica de órganos relevantes de peces habitantes de las ciénega de Sisal con diferente influencia antrópica.
metadata.dc.description.hypothesis:	Las actividades humanas en las zona litoral ha incrementado en los últimos años, y con ello el deterioro de los ecosistemas costeros. Se proponen que las principales causas de este deterioro es la descarga de aguas residuales y el depósito de residuos urbanos. Por lo tanto, se sugiere que los organismos habitantes de las zonas se encuentran expuestos a diversos factores de impacto. Una manera integral de evaluar el impacto es el análisis de la estructura de los tejidos de órganos relevantes como las branquias, hígado y gónadas, ya que los daños histológicos son el reflejo de la afectación a niveles de organización inferior (i.e. bioquímico y celular). Contar con procedimientos detallados de los análisis histológicos e histopatológicos de peces, permitirá contar con una herramienta docente que facilite la formación de alumnos de carreras de las ciencias biológicas, y por otro lado facilitará el trabajo práctico de alumnos de carreras multidisciplinarias que tienen escaso conocimiento en el manejo y análisis de tejidos biológicos.
metadata.dc.description.strategies:	La estandarización de los protocolos se realizará empleando peces de la ciénega de Sisal en sitios con diferentes niveles de impacto. La caracterización del nivel de impacto se realizará a través de la presencia o ausencia de asentamientos humanos y en la diferencia en la densidad poblacional y del tipo de actividades económicas y/o comerciales. Además, con el fin de considerar las diferencias climáticas, los muestreos se realizarán en temporadas contrastantes, es decir en la temporada de lluvias, nortes y secas durante un año. En cada subzona de la ciénega de Sisal, se realizarán mediciones de temperatura, pH, porcentaje de oxígeno disuelto, salinidad y sólidos disueltos totales con un multi-parámetro YSI 556MPS, y con ayuda de un medidor de profundidad y un GPS, se registrarán las profundidades y coordenadas de cada sitio. Los peces se capturarán con redes tipo atarraya y/o trampas (permiso de colecta en trámite). El método de eutanasia será mediante hipotermia (AVMA, 2013), inmediatamente después los organismos se impregnarán con solución fijadora Davison a través de punción en la zona ventral. Una vez en el laboratorio los peces se obtendrá su peso húmedo a través de balanza digital y se medirán con un ictiómetro. para obtener la longitud total. Análisis de la morfología externa se realizará a través del método adaptado por Robles et al. (2017). Posteriormente, las branquias, el hígado y las gónadas se disectarán y el hígado se pesarán en fresco en una balanza analítica. Para el cálculo del factor de condición se relacionará el peso con la longitud total de los organismos, mientras que para el cálculo del índice de gonadosomático y hepatosomático la gónada y el hígado se pesarán en fresco en una balanza analítica (Schreck y Moyle, 1990). La estadarización de los protocolos para el análisis histológico consistirá en el prueba de fijador que sea más adecuado para cada uno de los diferentes tejidos; se probarán el tipo de fijador: formol 10%, formol amortiguado y solución de Davidson. Una vez fijados, los tejidos se deshidratarán a través de una secuencia de soluciones de alcohol, posteriormente se incluirán en parafina Paraplast® (Marca Leyca) y se procederá a hacer cortes histológicos con un microtomo (Marca Leyca). El adecuado grosor de los cortes para cada uno de los órganos, se identificaran con base a la identificación clara de los diferentes tipos celulares. Los tejidos se teñirán con Hematoxilina & Eosina (H&E), sin embargo se harán pruebas para definir los tiempos necesarios de inmersión a cada colorante con el fin de tener un mejor contraste entre el organelos celulares de los tipos celulares. Una vez estandarizados los procedimientos del manejo de los tejidos, se procesarán las branquias, hígados y gónadas para realizar el diagnóstico de su estado histológico. La diagnósis se realizará en base al método propuesto por Bernet et al. (1999) a través de la estimación de los índices de daño de cada órgano, la magnitud de la alteraciones de los factores de importancia de cada alteraciòn, índice total del estado de cada órgano. Se identifcará las lesiones más importantes y con mayor prevalencia en los peces de cada especie y se procederá en la elaboración de un catálogo que ayude en la identificación de los daños histológicos. Para identificar relaciones de las afectaciones con las características ambientales de cada sitio, se harán análisis estadísticos con pruebas no paramétricas. Debido a que es altamente probable que la distribución de los datos sea no normal, los análisis de las relaciones de las afectaciones biológicas de los organismos de las especies estudiadas con las características propias de cada sitio (i.e. parámetros fisicoquímicos de agua y sedimento, estado trófico), y con las condiciones de la temporada climática, se realizará a través de análisis multivariado no paramétrico a través del programa Primer versión 7.
metadata.dc.description.selfAssessment:	El 100% de metas planteadas se cumplieron y los productos comprometidos se obtuvieron, por lo que el desempeño de los participantes del proyecto, tanto académicos colaboradores como alumnas, del proyecto se puede evaluar como muy satisfactorio. Se obtuvieron dos productos adicionales: infogramas y tríptico; a pesar de que el proyecto fue solo de un año. Los productos obtenidos correspondieron a 5 protocolos que se incluirán e la segunda parte del “Manual para la observación y valoración del estado de salud de peces y el análisis de su hábitat”. El manual se depositará en la página web del grupo de ecotoxicología (ecotoxicologíacostera.com). El manual será una excelente herramienta docente que permitirá conducir estudios sobre la condición del estado de salud de peces, particularmente a nivel de la estructura histológica de órganos relevantes: branquia, hígado y gónadas. En cuanto a la aportación científica y a la formación de recursos humanos se desarrollaron dos tesis de licenciatura, mismas que actualmente ya se concluyeron: una de las tesis (cuya información especifica que incluyó en la sección de Metas logradas), a cargo de la alumna Elizabeth García quien ya se tituló, y la segunda a cargo de la alumna Fernanda Pardiñas quien se encuentra realizando sus trámites de titulación. Los resultados de esta investigación se difundieron en dos eventos académicos, en el simposio de la RECORECOS y en la jornada académica por los XV años de la UMDI Sisal de la Facultad de Ciencias, lo anterior a pesar de que no se tenían contempladas partidas para la asistencia a congresos, simposia, etc. De los estudios realizados se generaron base de datos sobre afectaciones histopatológicas en un pez endémico de la Península de Yucatán Fundulus grandissimus, los cuales serán colocados en la página web del grupo de ecotoxicología. Los productos adicionales fueron: infogramas con información sobre los RSU que se generan en la zona costera de Yucatán y un tríptico con información sobre la producción de residuos en el puerto de Sisal, Yucatán, el cual se encuentra en un 90% de avance; lo que falta son dos ilustraciones. Esta información se divulgará por medios electrónicos a través de redes sociales y página web del grupo de ecotoxicología; además, será utilizado como material de divulgación y de apoyo en talleres de educación ambiental impartido por el grupo de ecotoxicología costera de la UMDI-Sisal como parte de sus actividades de difusión y de vinculación con y hacia la sociedad, con el fin de lograr la apropiación social de los trabajos e información científica que se obtiene sobre el estado de los ecosistemas costeros a causa del impacto de las actividades antrópicas. Además, durante los muestreos en los sitios de estudio se colectaron muestras de peces de la especie Poecilia velífera, lo que represente disponibilidad de material biológico para tesistas interesados en el tema. Se contó con el permiso de colecta de estas especies por parte de la SEMARNAT.
metadata.dc.description.goalsAchieved:	1. Se realizaron los protocolos sobre el análisis histopatológicos de branquias, de hígado y de gónadas de peces, sobre el aislamiento de bacterias en medios de cultivo para el análisis microbiológico de tejidos de animales, y sobre los métodos de anestesia, analgesia y eutanasia de peces. Estos cinco protocolos se integrarán como un segundo volumen o segunda parte, en el “Manual para la observación y valoración del estado de salud de peces y el análisis de su hábitat”. El archivo del manual de este producto se enviará en CD debido a su tamaño (mayor de 5MB). 2. Se realizó el diagnóstico de la calidad de los humedales costeros a través de la estimación del índice del estado de salud en los peces. El estudio correspondió a la tesis de la alumna Elizabeth Ramírez titulada “Evaluación del estado de salud del pez Fundulus grandissimus y su relación con la calidad de agua de humedales de Yucatán. Así mismo, la alumna María Fernanda Pardiñas Ramírez (becaria tesista del proyecto), de la Carrera de Ciencias Ambientales de la ENES Morelia, desarrolló la tesis “Residuos Solidos Urbanos (RSU) en la Ciénega de Sisal, Yucatán: cuantificación, impactos y percepción social”. El manuscrito de tesis se ha concluido y actualmente la alumna Pardiñas está realizando los trámites para su titulación. El documento se envía como archivo adjunto. 3. Los resultados obtenidos se difundieron en el VI Simposio de la Red para el Conocimiento de los Recursos Costeros del Sureste (RECORECOS) realizado en la Ciudad San Francisco de Campeche y en la sesión de carteles de las actividades académicas sobre los festejos de los 15 años de la UMDI Sisal de la Facultad de Ciencias realizado en la Sisal, Yucatán y en Cuidad Universitaria en la CDMX. En ambos eventos se presentaron los siguientes estudios: “Componentes tóxicos de los RSU y vulnerabilidad de los ecosistemas costeros de la Península de Yucatán” y “Construcción de un índice de salud para Fundulus grandissimus. Se incluirán las constancias de la participación de los eventos como archivos adjuntos. 4. Se realizaron bases de datos sobre las respuestas biológicas de los peces en los humedales costeros del poniente de Yucatán, con el fin de contar con información que permita comparar en tiempo y espacio, información sobre la calidad de humedales del país y de la región del sureste de México. Se anexa archivo adjunto de la base de datos. 5. Formación de recursos humanos: la alumna Elizabeth Ramírez realizó su tesis de licenciatura de la carrera de Biología de la FES Zaragoza y se tituló el 6 de marzo del presente año. La alumna María Fernanda Pardiñas Ramírez que realizó su tesis de licenciatura sobre Ciencias Ambientales de la ENES Morelia, se encuentra realizando los tramites para su titulación. Además: se realizaron infogramas con información sobre RSU y un tríptico “Los residuos sólidos urbanos y los humedales yucatecos”. Se envían los archivos digitales en adjunto.
metadata.dcterms.provenance:	Fac. Ciencias
metadata.dc.subject.DGAPA:	Biología
metadata.dc.type:	Proyecto PAPIME
Aparece en las colecciones:	2. Área de las Ciencias Biológicas, Químicas y de la Salud

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